蛋白印迹实验（Western blot）-光衍未来

蛋白印迹实验（Western blot）

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设备简介

低温寄送Tip
如果您的样品需要低温寄送，4℃左右可用冰袋寄送，-20℃和-80℃请干冰寄送。
如果需要我们为您提供干冰，干冰寄送时间需要1-2天，请提前联系我们的技术顾问。
如果有任何疑问，可联系光衍未来项目经理。

1. 预约前需要您确认的信息：
（1）明确样品中是否存在检测的目的蛋白？并且在哪个时期存在？是否需要外源性刺激其表达？（这些问题决定了前处理的方法和时间）
（2）目的蛋白的是否容易出现降解？分子量大小？是否存在于细胞或组织特定部位需要特殊方法提取？（这些问题涉及目的蛋白提取方案及是否可以寄送）
（3）目的蛋白含量是否达到wb的检测限？（目前认为Western Blot的有效检测下限为0.1-1ng，含量高有助于条带显影)。
样品要求
一、需要提供
1. 待测样品（材料或者样品处理后的细胞/蛋白，也可由我们代处理）；
2. 提供待测样品的一抗及其说明书（一抗一般为10ul左右，也可由平台代购）；
3. 其他所涉及的细胞、试剂盒以及生物耗材等平台都可以有偿提供。
二、送样须知
1. 细胞样品：细胞量1-2*10⁷个，需要用PBS 清洗后，离心收集细胞沉淀，不能残留PBS，封口膜封口，标记，放入-80°C 冰箱保存，干冰运输寄送。
2. 组织样品：200mg以上组织，取样品后尽量快速操作，放入液氮中速冻或者立刻存入-80°C 冰箱，样品不能反复冻融，干冰运输寄送。
3. 蛋白样品：未变性的蛋白需要存入-80°C ，干冰运输寄送；Loading Buffer煮沸的蛋白，需要提供蛋白浓度(浓度需在5μg/μl 以上，200μl样品)，冰袋运输寄送。
4. 植物组织样品：选取新鲜组织，200mg以上组织，尽量避免衰老，病变，发霉的组织；将样品剪成小块放入液氮预冷的螺口离心管中，在液氮中速冻5min，-80度保存，干冰运输寄送。
5. 血液样品：样品无潜在性携带病原体和病毒。如果存在病毒的可能性，请灭活处理；
（1）全血：采集新鲜血液，建议全血样品用全血样品RNA提取试剂盒抽提RNA，或者新鲜血液分离白细胞；处理后的样本放入干冰或者﹣80℃冰箱保存，干冰运输寄送。
（2）血浆：用EDTA等抗凝剂处理后的样本，4℃ 4000rpm离心5分钟，上层为血浆样本，按每200µl血浆样本加入1ml Trizol的比率加入足量Trizol，涡旋摇匀，放入干冰或者-80℃冰箱保存，干冰运输寄送。
（3）血清：用非抗凝管收集血样，静置分离上层血清，按每200uL血清加入1ml Trizol的比率加入足量Trizol，涡旋摇匀，放入干冰或者-80℃冰箱保存，干冰运输寄送。
6. 菌体：收集菌体到1.5ml的离心管内，离心去上清，用1*pbs洗涤三次，液氮速冻5min后，-80度保存。