氨基酸样品关键是样品必须均匀!粉末非纯样品一般提供2g左右,如果纯样或者含量高于50%可以提供150mg左右;液体样品可以提供10ml以上,浓度太低(低于5%)需要提供更多溶液
可测:游离氨基酸和水解氨基酸;
游离氨基酸指:样品中氨基酸直接以游离态存在,不需要水解前处理;
水解氨基酸指:样品中含有蛋白质、多肽等成分,需要通过水解等前处理将其水解成单个氨基酸再测试。
常规可测17种氨基酸:天门冬氨酸,苏氨酸,丝氨酸,谷氨酸,脯氨酸,甘氨酸,丙氨酸,胱氨酸,缬氨酸,蛋氨酸,异亮氨酸,亮氨酸,酪氨酸,苯丙氨酸,赖氨酸,组氨酸,精氨酸;
需要测其他氨基酸需要提前咨询确认!
测试条件
游离氨基酸常规前处理(仅参考):
样品加5%磺酸水杨酸沉淀蛋白(1:4),用高速冰冻离心机18000转/min离心30min,取上清液过保存,上机前用0.45µm+0.22µm滤膜过滤后上机分析。
水解氨基酸常规前处理(仅参考):
1、准确称取固体样品50—200mg (根据氨基酸的大体含量,如鱼粉可以少称,水果等可以大量称样),小心加入水解管中,注意:尽量防止挂壁。
2.、小心加入1:1 的分析纯盐酸(约6mol/L) 4ml
3、氮吹仪吹氮气15 分钟后封管。
3、将封管的样品置烘箱中 110 ℃水解 22-24 小时后,取出冷却开管。
4、样品定容至100ml。
5、准确吸取定容后的样品 2ml,置氮吹仪上脱酸。温度 60℃,脱至干燥。
6、准确加入0.02mol/L HCL旋涡器上混匀,过0.22µm过滤小柱,上机。
常规检测色谱条件(仅参考,具体已实际数据说明为准):
色谱柱规格:200mm*4.6mm ;离子交换树脂 阳离子树脂层析柱 ,检测器为紫外 ;显色剂为茚三酮 ;缓冲液系统为钠盐 ;缓冲液流速0.2 ml/min;柱温55 ℃, 反应室温138 ℃。用外标法测定样品溶液中游离氨基酸含量其脯氨酸检测波长为 440 nm 和其它氨基酸检测波长570 nm
氨基酸样品关键是样品必须均匀!粉末非纯样品一般提供2g左右,如果纯样或者含量高于50%可以提供150mg左右;液体样品可以提供10ml以上,浓度太低(低于5%)需要提供更多溶液