可见分光光度计（一）（分类、用途和使用方法）
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发布于：2022-12-19
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- 可见分光光度计广泛应用于食品、药品、电力、生物研究、教学科研、化学化工、质量监督、水质环保和商检等各大领域。可广泛应用于工厂、学校、冶金、农业、食品、生化、环保、石油化工、医疗卫生等单位的基础实验室。
- 可见分光光度计采用了光学系统设计和电路控制系统，设计十分严谨,元器件的选用控制严格,具有高标准的准确度、重复性、低噪声和低杂散光指标；
- 分光光度法的使用始于牛顿(Newton)。早在1665年牛顿做了一个惊人的实验:他让太阳光透过暗室窗上的小圆孔，在室内形成很细的太阳光束，该光束经棱镜色散后，在墙壁上呈现红、橙黄、绿、蓝、靛、紫的色带这色带就称为“光谱”。牛顿通过这个实验，揭示了太阳光是复合光的事实。
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- 常见分光光度计分类及其用途
- (1)可见分光光度计
- 用来测量待测物质对可见光(400～760nm)的吸光度并进行定量分析的仪器，称为可见分光光度计。可在600nm测定细菌细胞密度。
- (2)紫外可见分光光度计
- 紫外可见光谱仪用来测量待测物质对可见光或紫外光(200～760nm)的吸光度并进行定量分析的仪器。可以测定核酸和蛋白的浓度，也可以测定细菌细胞密度，紫外分光光度计又可分为单光束,假双光束,双光束。
- (3)红外分光光度计
- 一般的红外光谱是指大于760nm的红外光谱，这是研究有机化合物最常用的光谱区域，能分析各种状态(气、液、固)的试样，红外光谱法的特点是：快速、样品量少(几微克～几毫克)，特征性强(各种物质有其特定的红外光谱图)、能分析各种状态(气、液、固)的试样以及不破坏样品。
- (4)荧光分光光度计
- 荧光分光光度计是用于扫描液相荧光标记物所发出的荧光光谱的一种仪器，应用于科研、化工、医药、生化、环保以及临床检验、食品检验、教学实验等领域，通过对这些参数的测定, 不但可以做一般的定量分析, 而且还可以推断分子在各种环境下的构象变化,从而阐明分子结构与功能之间的关系。
- (5)原子吸收分光光度计
- 主要适用样品中微量及痕量组分分析常规仪器之一，是材料分析及质量控制部门进行常量、微量金属(半金属)元素分析的有力工具。
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- 使用分光光度计的步骤与方法
- （1）预热仪器：
- 为使测定稳定，将电源开关打开，使仪器预热20min，为了防止光电管疲劳，不要连续光照。预热仪器时和在不测定时应将比色皿暗箱盖打开，使光路切断。
- （2）选定波长：
- 根据实验要求，转动波长调节器，使指针指示所需要的单色光波长。
- （3）固定灵敏度档：
- 根据有色溶液对光的吸收情况，为使吸光度读数为0.2～0.7，选择合适的灵敏度。为此，旋动灵敏度档，使其固定于某一档，在实验过程中不再变动。一般测量固定在“1”档。
- （4）调节“0”点：
- 轻轻旋动调“0”电位器，使读数表头指针恰好位于透光度为“0”处（此时，比色皿暗箱盖是打开的，光路被切断，光电管不受光照）。
- （5）调节T=100%：
- 将盛蒸馏水(或空白溶液或纯溶剂)的比色皿放入比色皿座架中的第一格内，有色溶液放在其它格内，把比色皿暗箱盖子轻轻盖上，转动光量调节器，使透光度T=100%，即，表头指针恰好指在T=100%处。
- （6）测定：
- 轻轻拉动比色皿座架拉杆，使有色溶液进入光路，此时表头指针所示为该有色溶液的吸光度A，读数后，打开比色皿暗箱盖。
- （7）关机：
- 实验完毕，切断电源，将比色皿取出洗净，并将比色皿座架及暗箱用软纸擦净。
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